ELISA实验过程中常见问题与解决方法

更新时间：2020-04-23

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　　ELISA试剂盒以其特重复性好、异性强、敏感性高等优点，在科研中深受各大科研工作者的喜爱。

　　ELISA方法实验常会出现一些结果不好的现象，小编总结了常见的几大类问题和对应的解决方案，具体如下：

　　ELISA实验结果显色淡、灵敏度偏低

　　可能原因与具体解决办法如下：

　　1、试剂盒在运输途中时间太长，温度太高

　　解决办法：尽量缩短运输时间，夏季应放冰块降温

　　2、试剂盒未充分平衡

　　解决办法：试剂盒从2～8℃冰箱取出后打开盒盖，于室温平衡至少20分钟，确保所有试剂已平衡至室温（约25℃）。

　　3、培养箱温度不足37℃

　　解决办法：注意培养箱温度，放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定，非隔水式培养箱尤其应注意

　　4、保温时间不足

　　解决办法：校正定时钟定时

　　5、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加

　　解决办法：按说明书要求保留洗涤时间，记住洗涤次数

　　6、移液器吸液量不足，吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁

　　解决办法：校正移液器，吸嘴要配套，装吸嘴时要紧密，吸嘴内壁要清洁，*一次性使用

　　7、蒸馏水水质有问题

　　解决办法：使用新鲜合格的蒸馏水

　　8、底物作用时间不足

　　解决办法：定时

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