关于ELISA试剂盒常用实验原理方法介绍

2020-09-27 ELISA，即酶联免疫吸附实验，其基本原理是将一定浓度的抗原或者抗体通过物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入待检标本，通过酶标物显色的深浅间接反映被检抗原或者抗体的存在与否或者量的多少。ELISA技术作为免疫标记技术（包含免疫荧光技术，免疫放射技术，免疫酶技术和免疫胶体金技术）中的一种，已广泛应用于科研和临床实验中，具有快速，定性或者定量甚至定位的特点。1.竞争法竞争法一般分为直接竞争法和间接竞争法，这里我们以直接竞争法为例进行原理讲解。直接竞争法，其基本原理是：将合...

ELISA试剂盒对温度环境有哪些要求？

2020-08-18 ELISA属固相，抗原、抗体的结合只在固相表面上发作。以抗体包被的夹心法为例，参加板孔中的标本，其间的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的时机，只有靠近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的进程，因而需经分散才干到达反响的终点。在其后参加的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反响总是需求必定时刻的温育。ELISA试剂盒中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。加样时应将所加物加在ELISA试剂盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并...

导致ELISA试剂盒变质的原因有哪些

2020-08-11 ELISA试剂盒变质是ELISA实验中比较常见的问题，那么，ELISA试剂盒变质是因为什么呢？是什么影响了ELISA试剂盒质保？一旦变质会有什么影响呢？一、方法学的影响ELISA测定模式包括以下几种：双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉法、竞争抑制法，其中竞争抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作时差所引起的不gong平竞争等因素的影响，结果重复性较差，质量较难控制。二、试剂因素不同批次的ELISA试剂在制作过程中很难保证质量*一致，即使是通过批批检的项...

ELISA试剂盒实验前常规样本的收集及处理方法

2020-05-27 ELISA试剂盒检测的目的是为实验提供可靠定量分析实验的依据。它的每一步都需要大家谨慎小心，在收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。收集后当天就进行检测的样本及时储存在4℃冷藏箱中备用。对于隔天再检测的样本及时分装后冻存在-20℃冷藏箱中备用，有条件的*是在-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。同时为了保证实验数据的可靠性，在实验过程中必须坚持全面质量控制和全过程质量控制。我们实验中的常规标本：包括血清、血浆、尿液、组织、细胞培养上清等。1．血清...

ELISA试剂盒的包被问题是什么？

2020-05-20 在使用ELISA试剂盒进行实验的时候，需要注意很多问题，比如温育、显色、包被等问题。其中，包被是要特别注意的一个问题，直接关系到实验的效果。今天小编就领着大家一起来看看这其中的奥妙吧！包被的方式将抗原或抗体固定在过程称为包被(coating)。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用。这种物理吸附是非特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响。大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易吸...

人（Human）HA tag标签（HA tag） ELISA检测试剂盒

2020-05-19 本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）HAtag标签（HAtag）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被HAtag标签（HAtag）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的HAtag标签（HAtag）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（...

ELISA实验过程中常见问题与解决方法

2020-04-23 ELISA试剂盒以其特重复性好、异性强、敏感性高等优点，在科研中深受各大科研工作者的喜爱。ELISA方法实验常会出现一些结果不好的现象，小编总结了常见的几大类问题和对应的解决方案，具体如下：ELISA实验结果显色淡、灵敏度偏低可能原因与具体解决办法如下：1、试剂盒在运输途中时间太长，温度太高解决办法：尽量缩短运输时间，夏季应放冰块降温2、试剂盒未充分平衡解决办法：试剂盒从2～8℃冰箱取出后打开盒盖，于室温平衡至少20分钟，确保所有试剂已平衡至室温（约25℃）。3、培养箱温度不...

雪卡毒素检测试剂盒实验原理

2020-04-09 雪卡毒素酶联免疫分析（ELISA）本试剂盒仅供研究使用。1使用目的：本试剂盒用于鱼、虾和肉类组织（如鸡、牛肉和猪肉），鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样等样本中雪卡毒素的定量检测。2实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有雪卡毒素偶联抗原，加入雪卡毒素标准品或样品，游离雪卡毒素与微孔条上预包被的雪卡毒素偶联抗原互相竞争抗雪卡毒素抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中雪卡毒素含量成反比，通过标准...